“Bioline,siRNA轉染試劑,假病毒包裝,熒光定量PCR試劑,唾液DNA提取試劑”/

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熒光定量PCR實驗注意避免交叉污染!
發布者:百代生物  來源:  發布時間:2017-11-25


正確的實驗技巧是成功的熒光定量PCR反應重要然而常被忽視的要素。為得到最佳的實驗結果,實驗人員要盡可能減少樣品間交叉污染的可能,避免將核酸從一個實驗帶入下一個實驗。


以下措施有助于避免實驗污染問題:

1.用稀釋的漂白劑或凈化劑抹擦工作臺

2.在指定地配有紫外燈的超凈室、罩式或臺式超凈臺中準備樣品,理想的條件是樣品準備與PCR擴增分開在不同的區域,注意避免質?;驍U增子污染樣品準備區,絕不要將擴增后產物帶入指定潔凈區

3.在樣品準備和配制反應液過程中勤換手套

4.使用軸防護裝置的移液器和帶濾芯的移液器頭

5.勤用稀釋的漂白劑清潔移液器

6.只使用PCR級的水和PCR專用試劑進行PCR實驗

7.用帶旋蓋的EP管稀釋和配制反應液


注意:

在進行PCR實驗時,還應準備一個無模板的對照來驗證有無污染發生,而且用熱啟動酶防止反應開始之前的非特異性擴增。

 

為最小化實驗結果的統計學偏差,先制備混合反應液,建議所有樣本有三個重復。

 

大劑量包裝的反應試劑,使用前進行分裝,盡量減少試劑的反復凍融。


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